Бактеріальний контроль та мікробіологічна безпека компонентів крові
Галузевий регламент профілактики бактеріальної контамінації, методів скринінгу тромбоцитарних компонентів, візуальної оцінки макропрепаратів та алгоритмів реагування при підозрі на сепсис. Розроблено відповідно до вимог EDQM (Blood Transfusion Guide), AABB, WHO та нормативної бази МОЗ України.
Первинна профілактика бактеріального забруднення під час донації
Головними джерелами бактеріальної контамінації є мікрофлора шкіри донора у місці венепункції та транзиторна бактеріємія. Превентивні заходи у суб’єктів системи крові (ССК) направлені на критичне зниження вхідного ризику.
Використання валідованих спиртових розчинів хлоргексидину або повідон-йоду. Строге дотримання експозиційного часу — не менше 30 секунд до повного висихання шкіри перед проведенням венепункції.
Автоматичне відведення перших 20–30 мл донорської крові у спеціальний супутній контейнер. Це ефективно видаляє мікроскопічний епідермальний зріз шкіри та знижує ризик контамінації на понад 85%.
Ключові патогени за умовами зберігання компонентів:
- Тромбоцитарні компоненти (+20 °C ... +24 °C): Найвища зона ризику. Переважає грам-позитивна флора шкіри (Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus aureus, Cutibacterium acnes), а також грам-негативні бактерії (Serratia marcescens, Enterobacter spp.).
- Еритроцитарні компоненти (+2 °C ... +6 °C): Ризик розмноження психрофільних грам-негативних мікроорганізмів, здатних рости в умовах низьких температур (Yersinia enterocolitica, Pseudomonas spp., Serratia liquefaciens).
Порівняльна характеристика шкірних антисептиків (Стандарти ВООЗ, AABB, EDQM)
Вибір ефективного антисептика та суворе дотримання методики обробки ліктьового згину визначають рівень мікробіологічної безпеки заготовленої крові.
| Антисептичний агент | Спектр та швидкість дії | Пролонгований ефект | Час експозиції (висихання) | Переваги та обмеження |
|---|---|---|---|---|
| 2% Хлоргексидину біглюконат у 70% ізопропіловому спирті | Швидка бактерицидна дія проти грам-позитивних та грам-негативних бактерій. | Високий (> 6 годин) Зв'язується з епідермісом. |
30 секунд до повного висихання. |
Золотий стандарт ВООЗ / AABB. Спирт забезпечує миттєве знезараження, а хлоргексидин запобігає повторному бактеріальному росту. |
| 70% Етанол / Ізопропанол (однокомпонентний) | Миттєва бактерицидна дія за рахунок денатурації білків клітинної стінки. | Відсутній Випаровується без залишку. |
30 секунд до повного висихання. |
Швидка дія, але через відсутність пролонгованого ефекту бактерії з глибоких пор шкіри можуть швидко повторно обсіменяти ділянку. |
| 10% Повідон-йод (водний або спиртовий розчин) | Широкий спектр проти бактерій, спорових форм, вірусів та грибів. | Помірний (2–4 години) Поки зберігається забарвлення. |
1.5 – 2 хвилини (потрібен довший контакт). |
Альтернатива при алергії на хлоргексидин. Потребує суворого дотримання інтервалу висихання; може викликати подразнення у sensitivity-донорів. |
Лабораторні методи скринінгу тромбоцитарних компонентів
Зберігання тромбоцитів за кімнатної температури вимагає обов’язкового бактеріального контролю або застосування редукції патогенів перед видачею у Лікарняні банки крові (ЛБК) та клінічні відділення.
| Методологія | Принцип роботи | Час відбору зразка | Переваги та обмеження |
|---|---|---|---|
| Автоматизований культуральний метод (BacT/ALERT, BACTEC) |
Безперервний флуоресцентний або колориметричний моніторинг виділення вуглекислого газу (CO2) бактеріями у флаконах з аеробним та анаеробним середовищем. | Через 36 годин або більше після донації (об’єм зразка: 8–10 мл на флакон). | Золотий стандарт Висока чутливість (1–10 КУО/мл). Потрібен час інкубації (від 12 до 24 годин). |
| Експрес-тести перед видачею (Rapid Testing / Immunoassay) |
Імунохроматографічне виявлення пептидогліканів або тейхоєвих кислот клітинної стінки бактерій. | Безпосередньо перед видачею у ЛБК (на 4–7 добу зберігання). | Швидкий результат Готовність за 30–45 хвилин. Вища межа виявлення (від 10 000 до 100 000 КУО/мл), розрахована на масивний ріст. |
| Вимірювання pH та глюкози (Метаболічний скринінг) |
Оцінка споживання глюкози та закислення середовища (рівень pH менше 6.4) внаслідок життєдіяльності бактерій. | Поточний моніторинг під час зберігання. | Орієнтовний метод. Низька специфічність (залежить від щільності тромбоцитів та умов газообміну). |
Візуальний контроль макропрепаратів та приймання в ЛБК
Обов’язковий етап перед видачею компонентів із ССК та під час їхнього приймання фахівцями Лікарняного банку крові (ЛБК).
Оцінка прозорості та кольору: потемніння маси, темно-коричневий або багровий відтінок надосадової рідини / супернатанту, поява згустків чи вираженого гемолізу свідчить про активну життєдіяльність бактерій (наприклад, Yersinia enterocolitica).
Оцінка ефекту «завивання» (swirling): при пропущенні світла крізь контейнер для взяття крові (гемакон) має спостерігатися шовковистий оптичний перелив дископодібних тромбоцитів. Відсутність феномену завивання (swirling) або поява агрегатів — пряма ознака бактеріального росту чи втрати життєздатності.
Алгоритм дій при позитивному сигналі росту та підозрі на сепсис
Кроки реагування лабораторії та клінічної служби:
- 1. Негайна ізоляція (Електронний та фізичний замок): У разі виявлення позитивного сигналу в культуральній системі гемакон та всі супутні компоненти від цієї ж донації (плазма, еритроцитарна маса) негайно вилучаються з обігу з накладанням статусу БРАК / КАРАНТИН.
- 2. Відкликання виданих компонентів (Recall): Якщо компонент уже відвантажено в ЛБК або клінічне відділення, черговий фахівець ССК терміново повідомляє відповідальних осіб для зупинки інфузії та вилучення продукту.
- 3. Бактеріологічна ідентифікація: Зі скомпільованої дози виконують фарбування за Грамом, пересів на тверді поживні середовища та ідентифікацію збудника з визначенням чутливості до антибіотиків.
- 4. Дії при гострій реакції біля ліжка пацієнта: При розвитку лихоманки з ознобом, гіпотензії чи шоку під час трансфузії — інфузію негайно зупиняють. З гемакона та з вен пацієнта (із двох різних ділянок) беруть зразки крові для гемокультури.
Джерела та де читати далі
Мікробіологічний контроль, sample diversion, зберігання тромбоцитів.
Вимоги до бактеріологічного скринінгу та візуального контролю.
Гемонагляд і розслідування септичних реакцій.
Національні вимоги до контролю якості компонентів.
Матеріал освітній. Перед клінічним застосуванням звіряйте актуальні накази МОЗ, локальні СОП і рекомендації EDQM/AABB. Рішення щодо пацієнта або донора приймає лікар.